生体サンプルのIRイメージングといえば、最も効果的な手法の1つはヌジョールマル法.この方法では、生体試料を細かく粉砕して調製し、鉱物油の一種であるヌジョールと混合する。この混合物を、赤外線に対して透明なKBrまたはNaCl製の塩プレートに薄く広げる。最後に、分光分析のためにサンプルをIRビームの経路に置く。
生体試料のIRイメージングに利用できる技術はどれでしょうか？(ヌジョル・マル・テクニックをマスターする4つのステップ）
1.試料の前処理
Nujol Mull法の最初のステップは、生体試料の調製である。組織、細胞、その他の生物学的物質であるサンプルを微粉末にします。目標は、平均粒子径を約1～2ミクロンにすることです。これにより、粒子が赤外光を効果的に透過するのに十分な大きさになる。
2.Nujolとの混合
次に、微粉砕したサンプルを鉱物油の一種であるヌジョールと混合する。Nujolは、粉末試料と均質なペーストを形成するのに役立つマリング剤として機能する。Nujolを使用する利点のひとつは、赤外領域に大きな吸収がないことである。そのため、生体試料のスペクトルを明瞭に観察することができる。
3.塩プレートへの応用
次に、ヌジョールと試料の混合物をKBrまたはNaClプレートの片面に塗布する。その上にもう1枚のプレートを置き、穏やかにこするようにして混合液をプレート間に均一に広げる。出来上がった膜はわずかに半透明で、気泡がないはずである。
4.IR分析
最後に、調製したサンプルをIRスペクトロメーターで分析する。IR放射が薄膜を通過し、生体分子による特定の波長の吸収から、その構造や官能基に関する情報が得られる。
この方法は、溶解しにくいサンプルや溶液中で分解する可能性のあるサンプルの分析が可能なため、特に生物学的サンプルに適している。Nujol mull法はシンプルで比較的短時間で行え、高価な装置を必要としないため、様々な実験室で利用できる。
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