オートクレーブを正しく取り扱うには、運転前の点検、適切な積み込み、正しいサイクルの選択、慎重な取り出しプロセスを含む体系的な手順に従う必要があります。主な手順には、水の追加、材料の積み込み、ドアの確実な閉鎖、適切な温度と圧力での滅菌サイクルの実行、そしてユニットが完全に冷却・減圧されるのを待ってから滅菌されたアイテムを慎重に取り出すことが含まれます。
オートクレーブの安全かつ効果的な操作は、単なる機械的な作業ではありません。それは高圧蒸気の物理学に根ざした厳格なプロトコルです。真の滅菌を達成し、さらに重要なこととしてオペレーターの安全を確保するためには、すべての手順を細心の注意を払って順守することが不可欠です。
オートクレーブ滅菌の原理
無菌性を達成する方法
オートクレーブは湿熱滅菌の原理に基づいて動作します。通常121°Cから134°Cの間に加熱された蒸気を高圧下で使用します。
この高温と高圧の組み合わせは、耐性のある細菌の芽胞を含むすべての微生物の必須タンパク質や酵素を変性させることにより、それらを殺すのに非常に効果的です。
一般的な用途
この方法は、医療、研究室、研究環境における幅広い材料の滅菌のためのゴールドスタンダードです。
用途には、手術器具、実験器具やガラス製品、液体培地の滅菌、およびバイオハザード廃棄物の除染が含まれます。
ステップバイステップの操作プロトコル
フェーズ1:準備と点検
サイクルを開始する前に、オートクレーブが使用可能であることを確認します。まず、前のサイクルのアイテムが残っていないかチャンバーを点検します。
オートクレーブの内部が清潔であることを確認します。汚れたチャンバーは滅菌プロセスを損なう可能性があります。
最後に、必要な量の脱イオン水または蒸留水を加えます。滅菌に必要な蒸気を発生させるためには、適切な水位が極めて重要です。
フェーズ2:チャンバーへの積み込み
アイテムをチャンバー内に配置し、きつく詰め込みすぎていないことを確認します。完全な蒸気浸透を可能にするためには、適切な間隔が不可欠です。
容器やパッケージを、空気の除去とすべての表面への蒸気の接触を促進するように配置します。液体培地の場合、容器をきつく密閉しないでください。圧力の均等化を可能にするために、キャップはわずかに緩めておく必要があります。
フェーズ3:固定とサイクルの開始
オートクレーブのドアを閉め、しっかりと掛け金がかかっているか、または締め付けられていることを確認します。圧力の構築と維持のためには、適切な密閉が不可欠です。
操作パネルで、処理する材料(例:液体、ガラス製品、廃棄物)に基づいて適切な滅菌サイクルを選択します。手動モデルを使用する場合は、正しい時間と温度を設定します。
スタートボタンを押してサイクルを開始します。オートクレーブは加熱を開始し、チャンバーから空気をパージし、圧力を構築します。
フェーズ4:冷却と減圧サイクル
滅菌フェーズが完了した後、オートクレーブは冷却および減圧サイクルに入ります。このフェーズ中にドアを開けようとしないでください。
チャンバーが開けられるようになる前に、チャンバーが大気圧(圧力計でゼロ)に戻り、安全な温度まで冷却される必要があります。最新のオートクレーブには、チャンバーが加圧されている間はドアが開かないようにする安全インターロックが装備されています。
フェーズ5:安全な取り出し
圧力計がゼロを示したら、極度の注意を払って進むことができます。ドアから離れて立ち、ドアをわずかに(約1インチ)開けて、残留蒸気がゆっくりと排出されるようにします。
ドアを少し開けた後、内容物を少なくとも10分間冷まします。これにより、過熱された液体が突沸するのを防ぎ、蒸気による火傷のリスクを最小限に抑えます。
適切な個人用保護具(PPE)、ラボコート、目の保護具、耐熱手袋を着用して、熱いアイテムを取り出します。それらを完全に冷ますために指定された安全な場所に置きます。
一般的な落とし穴と安全手順
不完全な滅菌
最も一般的な失敗はオペレーターのエラーによるものです。チャンバーの過負荷、材料に対して間違ったサイクルの使用、またはアイテムの詰め込みすぎは、適切な蒸気浸透を妨げ、不完全な滅菌サイクルにつながる可能性があります。
火傷や蒸気による火傷のリスク
オペレーターに対する最も差し迫った危険は、蒸気と過熱された液体から生じます。サイクル直後に熱い液体の容器を揺らしたり、キャップを外したりしないでください。これは激しい突沸を引き起こす可能性があります。オートクレーブから取り出されたすべてのアイテムは極めて熱いものと常に想定してください。
こぼれた場合の対処
こぼれが発生した場合は、ユニットを操作しないでください。室温まで冷めるのを待ってから清掃してください。特にバイオハザード材料については、適切なスピルキットと清掃プロトコルを使用し、インシデントをオートクレーブのログブックに記録してください。
目的に合った正しい選択をする
- 液体の滅菌(例:培地)が主な目的の場合:減圧フェーズ中に培地が突沸するのを防ぐために、専用の液体サイクルまたは「スロー排気」サイクルを使用します。
- 固形器具やガラス製品の滅菌が主な目的の場合:アイテムが清潔で適切に間隔が空けられていることを確認し、蒸気がすべての表面に到達できるようにし、標準の「重力」または「真空」サイクルを使用します。
- バイオハザード廃棄物の除染が主な目的の場合:専門のオートクレーブ対応バッグと容器を使用し、密度の高い材料の完全な滅菌を保証するためにサイクル時間を延長します。
オートクレーブ手順を習得することは、作業の完全性と個人の安全に直接影響を与える基本的なスキルです。
要約表:
| ステップ | 主要なアクション | 重要な考慮事項 | 
|---|---|---|
| 1. 準備 | チャンバーの点検と水の追加 | 脱イオン水または蒸留水を使用する | 
| 2. 積み込み | 間隔を空けてアイテムを配置する | 蒸気浸透を確実にする | 
| 3. サイクル開始 | ドアを固定しサイクルを選択する | 材料の種類に適したサイクルを選択する | 
| 4. 冷却 | 減圧を待つ | 圧力がゼロになるまでドアを開けない | 
| 5. 取り出し | 蒸気を排出しPPEを使用する | 耐熱手袋と目の保護具を着用する | 
ラボの滅菌が安全かつ効果的であることを確認してください
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