SEM(走査型電子顕微鏡)分析用のサンプルの準備には、サンプルを適切に保存し、詳細なイメージングができるようにするためのいくつかの重要なステップがあります。
7つの重要なステップ
1.アルデヒドによる一次固定
このステップでは、アルデヒドを用いてサンプル中のタンパク質を固定します。アルデヒドはタンパク質の構造を保持し、分解を防ぐのに役立つ。
2.四酸化オスミウムによる二次固定
一次固定後、サンプルは四酸化オスミウムで二次固定される。このステップにより、サンプル中の脂質が固定され、画像化のためのコントラストが得られる。
3.溶媒による脱水
次に、エタノールやアセトンなどの一連の溶媒を用いてサンプルを脱水する。脱水により試料から水分を除去し、乾燥に備えます。
4.乾燥
サンプルを脱水したら、乾燥させる必要がある。これは、臨界点乾燥、凍結乾燥、あるいは単なる風乾など、さまざまな方法で行うことができる。目的は、サンプルから溶媒の痕跡をすべて取り除くことである。
5.スタブへのマウント
乾燥した試料は、次にスタブ(小さな金属製の円柱または円盤)に取り付けられる。このスタブは、イメージング中に試料を安定したプラットフォームにします。
6.導電性材料のスパッタコーティング
帯電を防ぎ、導電性を向上させるため、試料はスパッタコーターを用いて金やカーボンなどの導電性材料で薄くコーティングされる。このコーティングにより、SEM分析中に電子ビームが試料と適切に相互作用できるようになります。
7.装置メーカーのガイドラインを参照する
試料の性質やSEM分析の具体的な要件によって、具体的な試料前処理技法が異なる場合があることに注意することが重要です。したがって、試料調製については、装置メーカーのガイドラインやプロトコルを参照することが不可欠です。
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